液相色谱柱问题总汇

  液相色谱柱是液相色谱仪的中心，咱们在运用的过程中难免会遇见各式各样的问题，今日就把液相色谱柱最常见的一些问题和处理办法共享给我们

  ⑩检测器与记录仪超出校正曲线。处理办法为查看记录仪与检测器，重作校正曲线.做HPLC剖析时，柱压不稳定，原因安在?怎么处理?

  柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，并且常常并不是柱子自身的问题，您可按下面过程查看问题的原因：①拆去维护预柱，看柱压是否还高，否则是维护柱的问题，若柱压仍高，再查看;

  ②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路阻塞，需清洗，若压力下降，再查看;

  ③将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的活动相冲刷柱子，(此刻不要衔接检测器，以防固体颗粒进入活动池)。这时，假如柱压仍不下降，再查看;只用于运用过的柱子。

  ④替换柱子进口筛板，若柱压下降，阐明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板阻塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联络。正常的状况下，在进样器与维护柱之直接一个在线过滤器便可防止柱压过高的问题。

  不少做色谱别离实验的人遇到过这样的景象：不小心未及时弥补活动相，泵将溶剂瓶中的活动相吸干了，HPLC体系由此而停止工作了。如此状况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中一切活动相都排干了?液相色谱柱还能运用吗?事实上，假如泵将溶剂瓶中的活动相吸干，并不会形成色谱柱的损坏。即便泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。由于泵只能运送液体，而不能运送空气

  相比之下，另一个更有几率产生的状况是忘掉盖上色谱柱两头的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。相同，整个色谱柱干枯的状况不太易产生，八成或许仅仅是色谱柱两头的几个毫米变干了，因蒸发掉一切溶剂是色谱柱变干需求适当长的时刻。即便色谱柱真的变干了，也不一定就病入膏肓了。可以尝试用一种完全脱气的、外表张力低的溶剂(如，经氦气脱气的甲醇)冲刷色谱柱以除掉气体。较低的外表张力有助于滋润填料外表;已脱气的溶剂应该可以溶解并去除滞留在填猜中的气体。色谱柱大约需求(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时刻被完全滋润，康复到正常状况。

  加热回流脱气，脱气作用最佳，但无法坚持;氦脱气，此办法脱气作用佳，能除掉百分之九十以上的空气，但氦气价格太贵，所以用的不多;真空脱气，作用仅次于氦脱气，但脱气过程中易引起样品溶液蒸发丢失;超声脱气，只能脱去约百分之三十的空气，但在实验室中最常用。现在仍是尽量争夺用在线脱气，便利且作用好。

  设定泵运用一个独自通路(A)，翻开Purge阀，流速5mL/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至脱离液面，调查这些通路(B、C、D)内的溶剂是否跟着活动，正常时均不该活动。