色谱法别离的根底原理(共74张PPT)

  A、B型曲线是一条典型的吸附等温线。吸附色谱法属 于这类线可以精确的看出，溶质浓度低时Cs根本上正比于Cm，曲线

  洗脱色谱是根据样品组分在固定相和活动相之间 到达分配平衡，并跟着活动相向前活动时，重复 屡次的到达这种分配平衡。

  可以用分配系数K来进行定量评论。分配系数K指 在必定温度和压力下，组分在固定相和活动相 之间分配达平衡时的浓度之比值。

  K 组 组分 分在 在流 固动 定相 相中 中的 的浓 浓 CC度 度ms

  使用巨细不同的分子在多孔固定相中的挑选渗 透而到达别离的办法，称为凝胶色谱法或尺度 排阻色谱法。

  最近，又有一种新别离技能，使用不相同组分与固定 相（固定化分子）的高专特点亲和力进行别离的技 术称为亲和色谱法，常用于蛋白质的别离。

  法逐步应用于无色物质的别离，现在“色 谱”二字虽已失掉本来的意义，但仍被人 们沿用至今。

  在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管 内静止不动的一相（固体或液体）称为 固定相；

  因为组分在色谱柱中的保存时刻tM包含了组分随活动相通 过柱子所须的时刻和组分在固定相中停留所须的时刻，所

  保存时刻是色谱法定性的根本根据，但同一组 分的保存时刻常遭到活动相流速的影响，因而 色谱作业者有时用保存体积来表明保存值。

  根据两相物理状况分类 根据活动相的物理状况分为： 气相色谱（GC）； 液相色谱（LC )； 超临界流体为活动相的色谱为超临界流体色谱（SFC）。 气相色谱又可分为气固色谱（GSC）和气液色谱（GLC）。 液相色谱亦可分为液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）

  使用组分在吸附剂（固定相）上的吸附才能强弱 不同而得以别离的办法，称为吸附色谱法。

  使用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而 到达别离的办法称为分配色谱法。

  使用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力 巨细不同而到达别离的办法，称为离子交换色 谱法。

  简单了解，溶质流过色谱柱时，分配系数K值大，则保 留时刻就长，分配系数K值小，则保存时刻就短。因为不

  同的组分这种分配系数上的差异，发生活动的速率不同， 终究完成组分的别离。

  因为这种物质不被固定相吸附或溶解，故其活动 速度将与活动相活动速度附近。测定活动相均匀

  色谱柱后仅有活动相流出，并经过检测器检测的信号 。安稳的基线应该是一条水平直线。

  不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出 现峰极大值所需的时刻称为死时刻，它正比于色谱柱的空地体

  洗脱法也称冲洗法。作业时，首先将样品加到色 谱柱头上，然后用吸附或溶解才能比试样组分弱 得多的气体或液体作冲洗剂。因为各组分在固定 相上的吸附或溶解才能不同，被冲洗剂带出的先 后次第也不同，从而使组分相互别离。

  按相体系的方式与特征分为柱色谱、平板色谱。 固定相装于柱内活动相依托重力或外加压力的作

  固定相均匀的铺在玻璃板上或直接使用多孔滤纸 作固定相，活动相凭借毛细现象或重力效果到达 色谱别离的办法，因这类办法固定相呈平板状，

  茨维特在研讨植物叶子的色素成分时，将植物叶 子的石油醚萃取物，倒入填有碳酸钙的直立玻璃 管内，然后参加石油醚使其自在流下，成果色素 中各组分在玻璃管内相互别离，构成不相同的色彩的 谱带，因看到色带与光谱相同，因而取名为色谱 法。

  得曲线称为色谱流出曲线。曲线上Βιβλιοθήκη Baidu起部分便是

  假如进样量很小，浓度很低，在吸附等 温线（气固吸附色谱）或分配等温线（气液分 配色谱）的线性范围内，则色谱峰是对称的。

  代替法是将样品加到色谱柱头后，在惰 性活动相中参加对固定相的吸附或溶解 才能比一切试样组分强的物质为代替剂 （或直接用代替剂作活动相），经过色 谱柱，将各组分按吸附或溶解才能的强 弱次序，顺次代替出固定相。

  迎头法是将试样混合物接连经过色谱柱， 吸附或溶解才能最弱的组分首先以纯物 质的状况流出，其次则以榜首组分和吸 附或溶解才能较弱的第二组分混合物， 以此类推。